بررسی افزایش پایداری حلالی آنزیم لاکاز باکتریای با استفاده از تکنیک جهش زایی هدفمند

Authors

بهنام راسخ

خسرو خواجه

بیژن رنجبر

نسرین ملانیا

محمد فاضل فروغیان یزدی

abstract

چکیده: لاکازها ازجمله پلی فنل اکسیداز ها هستند که توانایی اکسید نمودن تعداد زیادی از ترکیبات فنلیک شامل فنل ها ، پلی فنل ها، ترکیبات آروماتیک آمین دار و نیز استخلاف های غیر فنلی با استفاده از اکسیژن مولکولی به عنوان پذیرنده نهایی الکترون را دارند. بنابر این، این آنزیم ها در فرآیند های بیوتکنولوژی نظیر سیستم های تصفیه فاضلاب، زیست سالم سازی خاک آلوده و غیره کاربرد فراوان دارند. نتایج تحقیقات قبلی نشان از افزایش پایداری دمایی آنزیم لاکاز باکتری بومی bacillus sp. hr03 با استفاده از تکنیک جهش زایی هدفمند (sdm) و نقش اسید آمینهe188 در ناحیه لوپ سطحی بین دومین 1 و2 در مقاومت دمایی آنزیم دارد. هدف از انجام این پژوهش بررسی مقاومت حلالی جهش یافته های اسید آمینه مذکور در حضور حلالهای دی متیل سولفوکساید (dms) و دی متیل فرمامید (dmf) می باشد. مقایسه پارامتر های سنتیکی از جمله kcat / km ، ∆∆g‡و c50 نشان از افزایش پایداری آنزیم های جهش یافته نسبت به آنزیم وحشی داشته که کاربرد صنعتی چنین آنزیم هایی را سهل تر می نماید.کلید واژگان: آنزیم لاکاز، جهش زایی هدفمند، پایداری حلالی.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

جهش زایی در آمینواسید 428 (e428k/q) آنزیم لوسیفراز به روش هدفمند و بررسی میزان فعالیت آنزیم و پایداری آن

واکنش آنزیمی بیولومینسانس با دخالت آنزیم لوسیفراز توسط کاتالیز اکسیداسیون لوسیفرین (lh2) در حضور atp و mg2+ و مولکول اکسیژن رخ داده و منجر به نشر نور می شود. لوسیفراز به-طور گسترده ای به عنوان گزارشگر مورد استفاده قرار می گیرد زیرا دارای حساسیت بالا و گستره فعالیت خطی است. نیاز روزافزون به آنزیم های سازگار از نظر اقتصادی و صنعتی در زیست شناسی، بیوتکنولوژی و پزشکی توجه بسیاری از پژوهشگران را به ...

افزایش پایداری آنزیم لوسیفراز گونه photinus pyralis در برابر هضم پروتئازها با استفاده از روش جهش زایی هدفدار

آنزیم لوسیفراز حشره شب تاب (ec; 1.13.12.7 ) اکسیداسیون لوسیفرین را در حضور یون های منیزیم، atp و اکسیژن مولکولی کاتالیز می کند. لوسیفراز آنزیمی تک زیر واحدی (62 kda) و دارای دو دمین n- ترمینال و c- ترمینال می باشد. این آنزیم، به عنوان ژن گزارشگر در in vivo imaging کاربردهای بسیار زیادی دارد. لوسیفراز در مقابل پروتئازها حساس و به سرعت غیر فعال می شود. تیمار این آنزیم با تریپسین نشان داده است که ...

15 صفحه اول

بررسی پایداری سینتیکی و ترمودینامیکی آنزیم لاکاز وحشی و جهش یافته

لاکازها (بنزن دیول اکسیژن اکسیدوردوکتاز¬ها، ec 1.10.3.2) عضوی از خانواده اکسیدازهای چند مسی هستند و به دلیل توانایی اکسید کردن گستره وسیعی از سوبسترا¬ها می¬توانند در بسیاری از فرآیندهای زیست ¬فناوری مورد استفاده قرار گیرند. لاکازهای باکتریایی نسبت به لاکاز¬های قارچی مزیت دارند ولی این لاکازها کمتر مورد بررسی قرار گرفته¬اند. پایداری ترمودینامیکی و سینتیکی آنزیم لاکاز وحشی و جهش¬یافته¬های آن مورد...

بررسی نقش اسیدآمینه های ویژه در فعالیت و پایداری آ نزیم کندروئیتیناز abc i با استفاده از جهش زایی هدفمند

آنزیم کندروئیتیناز abc iیک آنزیم باکتریایی با وزن مولکولی در حدود kda 112.5 و 997 اسیدآمینه است و به خانواده کندروئیتیناز ها تعلق دارد. این آنزیم قادر است galag ها (گالاکتوزآمینوگلیکان) را بشکند و ویژگی سوبسترایی وسیعی دارد ودر بین سوبستراهای گلیکوزآمینوگلیکان، کندرئیتین 4-سولفات، کندرئیتین 6-سولفات، درماتان سولفات و هیالورونیک اسید را با مکانیسم حذف ? می شکند. در مطالعات قبلی، کلونینگ و بیان آ...

15 صفحه اول

بررسی فعالیت و پایداری آنزیم لاکاز آزاد تثبیت شده در حضور کانی‌های مونتموریلونیت و زئولیت

آنزیم لاکاز از گروه مهمترین آنزیم­هایی است که در سال­های گذشته به سبب توانایی آن در اکسید کردن ترکیب‌های گوناگون و آلاینده­های محیطی پایدار، نگاه بسیاری را در زمینه زیست بهسازی به سوی خود جلب کرده است. با نگاه به پایداری کم و هزینه­های ساخت و فراوری بالای آنزیم­ها، بی‌جنب­سازی آنها بر رویه نگهدارنده­ها می­تواند راهی شایسته در راستای افزایش پایداری کارکرد آنزیم باشد. برای بررسی برهم­کنش لاکاز گر...

full text

افزایش کارایی متالوپروتئاز وابسته به روی(svp) در حضور حلال های آلی با استفاده از روش جهش زایی هدفمند

حلال های آلی با کندن مولکول های آب از سطح پروتئین باعث تخریب نیروهای غیر کووالان و کاهش فعالیت و پایداری آنزیم می شوند. این آنزیم از یک باکتری هالوفیل ایرانی که از دریاچه نمک جداسازی شده است، بدست آمده است. بر اساس نتایج تکامل جهت دار و کریستالوگرافی در حضور حلال های آلی، جهش یافته های a195e و g203d برای افزایش قطبیت در نزدیکی جایگاه فعال طراحی شدند تا به حفظ لایه آب پوشی در این منطقه در برابر ...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
زیست فناوری دانشگاه تربیت مدرس

Publisher: دانشگاه تربیت مدرس

ISSN

volume 5

issue 1 2014

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023